样品垫上样不吸收怎么办?
- 疏水性材质会导致样本展开困难,可在处理液中加入适量表面活性剂,提高润湿性和铺展速度。
- BSA 固化或浓度过高可能影响液体通过,建议配合 Tween-20 等助剂,并重新评估 BSA 用量。
- 样品垫预处理后应充分干燥并控制储存湿度,避免吸湿后导致批间流速差异。
标记垫不释放或不跑板怎么办?
- 胶体金颗粒不规则、聚集或粒径分布异常,容易产生“死金”,建议从金溶胶质量和偶联稳定性开始排查。
- 释放缓冲液需兼顾表面活性剂、蛋白保护剂和糖类保护剂,帮助金标复溶并降低玻纤吸附。
- 标记垫喷糖封闭和干燥参数要稳定,避免胶体金与玻纤发生静电吸附或释放不完全。
假阳性、背景高或灵敏度下降如何排查?
- 重点检查金标封闭是否充分、抗体浓度是否过高、缓冲液 pH 和盐浓度是否合适。
- 膜面背景高时,应同步评估喷膜量、封闭体系、样本基质干扰和跑板速度。
- 灵敏度下降往往与含水量、铝箔袋密封性、干燥剂状态及储存温度有关,需要做加速稳定性验证。
干燥时颜色变紫或变灰怎么办?
- 颜色异常通常提示胶体金颗粒发生聚集或失活,需优先检查干燥温度、湿度和时间。
- 过度干燥可能造成蛋白构象损伤,干燥不足又会影响长期稳定性,应建立可重复的干燥窗口。
- 建议通过小试矩阵验证温湿度组合,并结合跑板表现、背景和稳定性结果确定最终工艺。
Safheal 总结胶体金试纸条制作中的常见问题与解决方案,覆盖样品垫处理、标记垫释放、假阳性、灵敏度和干燥稳定性。