Was tun, wenn das Probenpad die Probe nicht aufnimmt?
- Hydrophobe Materialien können eine gleichmäßige Probenausbreitung verhindern. Ein geeignetes Tensid im Behandlungsbuffer verbessert die Benetzung.
- Zu viel oder fixiertes BSA kann den Fluss verlangsamen. Bewerten Sie den BSA-Gehalt neu und kombinieren Sie ihn mit Tween-20 oder ähnlichen Additiven.
- Nach der Vorbehandlung sollten Probenpads vollständig getrocknet und bei kontrollierter Luftfeuchtigkeit gelagert werden, um Chargenschwankungen zu reduzieren.
Was tun, wenn das Konjugatpad nicht freisetzt?
- Unregelmäßige oder aggregierte Kolloidgoldpartikel können inaktives Konjugat erzeugen. Prüfen Sie zunächst die Goldsol-Qualität und Kopplungsstabilität.
- Der Freisetzungsbuffer sollte Tenside, Proteinschutzstoffe und Zucker ausbalancieren, um die Rehydratation des Konjugats zu unterstützen und Glasfaseradsorption zu reduzieren.
- Zuckerauftrag und Trocknungsparameter sollten stabil sein, um elektrostatische Adsorption und unvollständige Freisetzung zu vermeiden.
Wie behebt man falsch positive Ergebnisse, hohen Hintergrund oder Sensitivitätsverlust?
- Prüfen Sie, ob das Blocking des Goldkonjugats ausreichend ist, die Antikörperkonzentration passt und pH-/Salzwerte des Buffers geeignet sind.
- Bei hohem Membranhintergrund sollten Dispensvolumen, Blocking-System, Matrixinterferenzen und Chromatographiegeschwindigkeit gemeinsam bewertet werden.
- Sensitivitätsverlust hängt häufig mit Feuchtegehalt, Folienbeutelversiegelung, Trockenmittelzustand und Lagertemperatur zusammen; beschleunigte Stabilitätstests werden empfohlen.
Warum wird der Streifen während der Trocknung violett oder grau?
- Eine Farbänderung weist meist auf Aggregation von Kolloidgold oder Aktivitätsverlust hin. Prüfen Sie zuerst Trocknungstemperatur, Luftfeuchtigkeit und Zeit.
- Übertrocknung kann die Proteinkonformation schädigen, während unzureichende Trocknung die Langzeitstabilität beeinflusst. Ein reproduzierbares Trocknungsfenster ist entscheidend.
- Nutzen Sie Pilotmatrizen, um Temperatur- und Feuchtigkeitskombinationen zu validieren, und bestätigen Sie diese mit Fluss-, Hintergrund- und Stabilitätsdaten.
Safheal fasst häufige Probleme bei der Herstellung von Kolloidgold-Lateral-Flow-Teststreifen zusammen, darunter Probenpads, Konjugatfreisetzung, falsch positive Ergebnisse, Sensitivität und Trocknungsstabilität.