¿Qué hacer si la almohadilla de muestra no absorbe la muestra?
- Los materiales hidrofóbicos pueden impedir una distribución uniforme de la muestra. Añada un tensioactivo adecuado al buffer de tratamiento para mejorar la humectación.
- Un nivel excesivo o fijo de BSA puede ralentizar el flujo. Reevalúe el nivel de BSA y combínelo con Tween-20 o aditivos similares.
- Tras el pretratamiento, las almohadillas de muestra deben secarse completamente y almacenarse con humedad controlada para reducir variaciones de lote.
¿Qué hacer si la almohadilla de conjugado no libera?
- Partículas de oro coloidal irregulares o agregadas pueden generar conjugado inactivo. Comience verificando la calidad del sol de oro y la estabilidad de acoplamiento.
- El buffer de liberación debe equilibrar tensioactivos, protectores proteicos y azúcares para favorecer la rehidratación del conjugado y reducir la adsorción en fibra de vidrio.
- La pulverización de azúcar y los parámetros de secado deben ser estables para evitar adsorción electrostática y liberación incompleta.
¿Cómo resolver falsos positivos, fondo alto o pérdida de sensibilidad?
- Compruebe si el bloqueo del conjugado de oro es suficiente, la concentración de anticuerpo es adecuada y el pH/sales del buffer son apropiados.
- Para un fondo alto en membrana, evalúe conjuntamente volumen dispensado, sistema de bloqueo, interferencia de matriz y velocidad cromatográfica.
- La pérdida de sensibilidad suele relacionarse con humedad, sellado de la bolsa de aluminio, estado del desecante y temperatura de almacenamiento; se recomiendan pruebas de estabilidad acelerada.
¿Por qué la tira se vuelve púrpura o gris durante el secado?
- El cambio de color suele indicar agregación de oro coloidal o pérdida de actividad. Revise primero temperatura, humedad y tiempo de secado.
- El secado excesivo puede dañar la conformación proteica, mientras que el secado insuficiente afecta la estabilidad a largo plazo. Es esencial una ventana de secado repetible.
- Use matrices piloto para validar combinaciones de temperatura y humedad, y confirme con datos de flujo, fondo y estabilidad.
Safheal resume problemas comunes en la fabricación de tiras de flujo lateral de oro coloidal, incluidas almohadillas de muestra, liberación del conjugado, falsos positivos, sensibilidad y estabilidad de secado.